于生物學(xué)、醫(yī)學(xué)研究中,細(xì)胞固定是一種常用技術(shù),用于保存細(xì)胞結(jié)構(gòu)以供顯微鏡觀察或其他分析。聚四氟乙烯全氟烷氧基樹脂〔PFA〕是一種高效固定劑,大量用途于流式細(xì)胞術(shù)、免疫熒光染色還有組織學(xué)行業(yè)。其固定原理主要涉及以下角度:
,PFA通過化學(xué)交聯(lián)作用實(shí)現(xiàn)細(xì)胞固定。PFA分子中甲醛基團(tuán)能夠和細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)、核酸、其他生物大分子有交聯(lián)反應(yīng),形成穩(wěn)固共價(jià)鍵。這種交聯(lián)不僅增強(qiáng)了細(xì)胞結(jié)構(gòu)穩(wěn)固性,還減少了細(xì)胞內(nèi)部成分降解,從而保持了細(xì)胞形態(tài)真實(shí)性、完整性。
PFA對(duì)細(xì)胞膜具有優(yōu)良滲透性。相比于其他固定劑,PFA可以更很好穿透細(xì)胞膜,到達(dá)細(xì)胞內(nèi)部各個(gè)區(qū)域,包括細(xì)胞核、線粒體亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)。這使得PFA能夠全面固定細(xì)胞所有組成部分,避免因固定不均導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)誤差。
另外,PFA還具有較低毒性,操作安全性較高,且不會(huì)顯著影響后續(xù)染色效果。其固定細(xì)胞適合進(jìn)行許多類型染色實(shí)驗(yàn),如免疫熒光標(biāo)記、原位雜交,為科研人員提供了極大便利。
上述概括起來PFA通過化學(xué)交聯(lián)、高滲透性實(shí)現(xiàn)細(xì)胞固定,是細(xì)胞生物學(xué)研究中無法替代很大工具。它于確保細(xì)胞結(jié)構(gòu)穩(wěn)固和此同時(shí),也為后續(xù)分析、檢測(cè)奠定了堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)。
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